公示时间：2019年5月20日至24日，公示期内如有异议请以实名书面形式实事求是地提出申诉理由和意见，在异议的书面材料上签名，并附上有关证明材料，报送学会秘书处，联系电话：0731-84305939，联系人：邓志红。
项目名称: 流感、禽流感及肠道病毒的分子检测及进化分析
项目完成人：张如胜 孙边成 陈静芳 欧新华 姚栋 黄政 叶文
提名意见: 该项目紧密结合传染病疾病预防控制工作实际，在流感、禽流感和肠道病毒实验室检测技术建立、病 原体鉴定和分子进化分析方面开展了一系列工作。 在国内外首次报道肠道病毒通用型和CV-A10型肠道病毒双重real-time RT-PCR方法及甲型H1N1流感病 毒一步RT-LAMP检测新方法；在国内外率先报道从流感样轻症病例中检出H7N9亚型禽流感病例并对病毒 分离株开展了全基因组测序分析；在国内外率先对甲型H1N1流感死亡病例病毒分离株开展了血凝素基因 进化分析；从活禽市场环境H5N1亚型禽流感病毒核酸监测、职业暴露人员血清学抗体监测和环境禽流感 病毒基因分析三个方面综合探讨了活禽市场环境中H5N1亚型禽流感病毒传播至普通人群的风险，为国内 最先报道；该项目获得了2009至2017年长沙市活禽市场环境中H5N1/H7N9/H9N2亚型禽流感病毒的污染情 况及其致病和传播风险，为长沙市及辖区疾控中心人流感、禽流感和手足口病疫情防控，以及活禽市场消 毒、休市和关闭措施的制定提供了重要的实验室数据和技术支撑，提高了辖区疾控中心相关传染病疫情的 防控能力。 该项目共发表论文20余篇（SCI论文4篇），其研究成果在长沙市所辖区疾病预防控制中心进行了应用 ，产生了显著的社会效益。拟提名湖南省科技进步三等奖
项目简介: 本项目自2009年起，先后对季节性流感病毒（甲型H1N1流感、季节性H1N1流感、B型流感）、禽流感病毒（H5N1、H7N9、H9N2）和新型肠道病毒（EV-71、CV-A16、CV-A10）等开展了分子检测及进化分析研究，在国内外率先建立了甲型HlNl流感病毒一步RT-LAMP检测方法、肠道病毒通用型和CV-A16型肠道病毒双重real-time RT-PCR方法以及人肠道病毒EV-71型F0F1-ATPase生物传感器检测新方法；利用分子生物学检测技术检出了长沙市历年来发生的湖南省首例人感染甲型H1N1流感病例、季节性H1N1流感学校暴发疫情、人感染H7N9亚型禽流感和H9N2亚型禽流感轻症病例等疫情病原体，成功鉴定出CV-A4、CV -A6、CV -A7、CV -A8、CV -A10、CV -A12、CV -B3、埃可病毒（echovirus）16和echovirus 25等少见的新型肠道病毒，为相关传染病疫情的早期处置提供了实验室“一锤定音”的关键作用。
在开展流感、禽流感和肠道病毒日常监测的基础上，利用核苷酸测序技术对长沙市辖区检出的甲型H1N1 流感病毒、季节性H1N1流感、B型流感、H5N1亚型禽流感、H7N9亚型禽流感、H9N2亚型禽流感和新型肠道病毒（EV-71、CV-A16、CV-A10）开展了分子进化分析，在美国国立生物信息技术中心（NCBI）公开基因序列117条，获得了不同亚型流感、禽流感病毒分离株的致病、受体、耐药和来源等分子特征，获得了肠道病毒长沙分离株的基因型别，分析了长沙市活禽市场环境中H5N1、H7N9和H9N2亚型禽流感病毒的致病和传播能力，结合现场流行病学资料，认为长沙市活禽市场环境中的禽流感病毒具备传播至普通人群的潜在风险，为长沙市乃至全国疾控系统相关传染病疫情的防控及活禽市场环境的消毒、休市和关闭提供了实验室技术支持。先后发表学术论文24篇，其中SCI收录期刊论文5篇、pubmed收录期刊论文1篇、CSCD收录期刊论文8篇，在国家、省、市级论文评选中获论文奖13篇次。
本项目紧密结合传染病疫情疾病预防控制工作实际，在流感、禽流感和肠道病毒实验室检测技术建立、病原体鉴定和分子进化分析方面做了一系列的工作，为历年来长沙市乃至全国相关传染病疫情的预防控制提供了宝贵的实验室数据和技术支撑作用，有效的保障了长沙市民的生命健康和经济社会的发展。
客观评价:
该项目紧密结合传染病疫情疾病预防控制工作实际，在流感、禽流感和肠道病毒实验室检测技术建立、病原体鉴定和分子进化分析方面开展了一系列工作。经湖南省医学会组织的专家组审查评议，评价得分：80.91分，形成如下意见：
该项目先后对季节性流感病毒、禽流感病毒和新型肠道病毒开展了分子检测及进化分析研究。该课题组在国内首次报道甲型H1N1流感病毒一步RT-LAMP检测方法、人EV-71型F0F1-ATPase 生物传感器检测新方法：在国内外率先报道从流感样轻症病例中检出H7N9亚型禽流感病例并对病毒分离株开展了全基因组测序分析；在国内外率先对甲型H1N1流感死亡病例病毒分离株开展了血凝素基因进化分析，为人H7N9亚型禽流感和甲型H1N1流感疫情防控提供了宝贵的实验室数据。该研究还从活禽市场环境H5N1亚型禽流感病毒核酸监测、职业暴露人员血清学抗体监测和环境禽流感病毒基因分析三个方面综合探讨了活禽市场环境中H5N1亚型禽流感病毒传播至普通人群的风险，为国内最先报道。
该项目在流感、禽流感和肠道病毒实验室检测方面建立的核酸检测技术，设计合理，方法科学。项目组通过核苷酸测序分析，在NCBI注册流感、禽流感及肠道病毒基因序列117条，掌握了相关病毒长沙分离株的来源、致病、受体及耐药等分子特征，获得了2009至2017年长沙市活禽市场环境中H5N1/H7N9/H9N2亚型禽流感病毒的污染情况及其致病和传播能力，为长沙市及辖区疾控中心人流感、禽流感和手足口病疫情防控，以及活禽市场消毒、休市和关闭措施的制定提供了重要的实验室数据和关键技术支撑，提高了该中心及辖区疾病控制系统相关传染病疫情的实验室检测能力。其研究成果在长沙市所辖区疾病预防控制中心进行了应用，产生了显著的社会效益，值得推广。
存在问题和建议:1、建议对于新的检测方法申请专利；2、该研究主要是建立在病毒核酸检测层面，是把已经成熟的检测和鉴定病原体的分子生物学方法应用于流感、禽流感和肠道病毒的检测和分析中，对创新程度有影响；3、该项目对病毒株的毒力、致病性、免疫原性及其他特性等研究较少，导致了该研究的不足和局限，建议进一步加强成果的后续研究和应用；4、研究对象过于分散，可以集中针对某类病原体开展更深入的研究，如致病机制、分子流行病学等。
推广应用情况:
项目研究成果为长沙市所辖区疾病预防控制中心开展人流感、禽流感、手足口病疫情防控及辖区活禽市场开展消毒、休市和关闭提供了关键技术支持：一是应用该成果为辖区发生的甲型H1N1流感疫情提供了检测技术支持和基因变异与否的参考依据；二是应用该成果掌握了辖区人感染H7N9禽流感疫情的分子流行特征；三是应用该成果为辖区高效处置手足口病疫情提供了技术支持；四是应用该成果获得了2014-2017年间辖区活禽市场环境禽流感病毒的污染情况，为辖区活禽市场开展消毒、休市和关闭提供了重要依据，有效降低了辖区活禽市场环境中禽流感病毒污染率，为辖区人禽流感疫情的防控提供了技术支持。上述研究成果的应用不但规范了辖区疾病预防控制中心的人流感、禽流感疫情防控工作，同时也为保障长沙市人民群众的生命健康和经济发展提供了实验室技术支持，社会效益巨大。
所发表的主要论文：
1、 Rapid detection of Enterovirus and Coxsackievirus A10 by a TaqMan based duplex onestep real time RT-PCR assay；
2、 The role of enterovirus 71 and coxsackievirus A strains in a large outbreak of Hand, foot, and mouth disease in 2012 in Changsha, China
3、 甲型H1N1流 感死亡病例三 株病毒分离株 血凝素基因测 序分析
4、 家禽市场环境 中H5N1亚型 禽流感病毒传 播风险研究
5、 Analysis of full-length genome of a novel strain of the H7N9 avian influenza virus
6、 Surveillance of influenza virus during 2010- 2012 in Changsha, China.
7、 家禽市场污水 来源的 H5N1亚型禽 流感病毒 NS基因分析
8、 逆转录-环介 导等温扩增方 法检测甲型 H1N1流感病毒
9、 长沙市2009年 甲型H1N1流 感病毒血凝素 基因特性分析
10、 长沙市首例人 感染H9N2禽 流感病毒的 HA基因序列 特征分析
项目主要完成人情况：
第一完成人张如胜；具体负责项目研究方案的设计、申报工作；具体承担甲型H1N1流感的测序及进化研究；具体承担长沙市辖区活禽市场环境禽流感病毒的分子进化研究；具体负责项目研究成果的应用和推广；具体负责项目研究工作报告、技术报告及论文的撰写。是以下论文作者：论文3；论文4；论文8；论文9。
第二完成人孙边成：负责活禽市场环境中H5N1亚型禽流感病毒的进化分析研究；负责手足口病疫情的监测及进化分析研究；负责人感染H7N9亚型禽流感疫情的分子检测及进化分析研究；负责项目研究成果的应用和推广；负责审校项目研究工作报告、技术报告和论文。是以下论文作者：论文1；论文2；论文5。
第三完成人陈静芳：具体完成肠道病毒型别的分子鉴定及进化分析工作；具体完成肠道病毒CV-A10 real-time RT-PCR 检测方法研究；具体完成流感病毒的监测及进化分析研究；参与撰写课题研究工作报告、技术报告和论文。是以下论文作者：论文1；论文2；论文6。
第四完成人欧新华：协调课题研究工作的顺利进行；承担研究成果在人流感、禽流感疫情中的应用和评估工作；承担人H7N9亚型禽流感疫情的分子检测及进化分析研究；具体负责甲型H1N1流感病毒RT-LAMP检测方法研究。是以下论文作者：论文5；论文6；论文7；论文8。
第五完成人姚栋：具体负责活禽市场环境禽流感病毒的分子检测及核苷酸测序工作；负责人流感、禽流感疫情的分子检测工作。是以下论文合作作者：论文1。
第六完成人黄政：负责人禽流感疫情的分子检测及核苷酸测序工作；负责活禽市场环境禽流感病毒的分子检测及核苷酸测序工作。是以下论文作者：论文10。
第七完成人叶文：负责手足口病的分子检测工作；负责活禽市场环境禽流感病毒的分子检测工作；负责流感病毒核酸的分子检测工作。
主要完成人合作说明：本项目由张如胜，孙边成，陈静芳，欧新华，姚栋，黄政，叶文共同合作完成，在2009年1月15日至2017年12月日期间，项目完成人通过共同立项和合作论文的方式进行合作，立项湖南省卫生计委2015年科研课题，发表论文20余篇。
主要完成单位情况: 长沙市疾病预防控制中心，为项目独立完成单位，负责： 1、制定研究方案、组织开展各项研究工作； 2、提供研究人员、经费、设备和技术支持； 3、开展流感、禽流感和手足口病疫情的应急检测； 4、组织课题研究成果的应用、培训工作 5、撰写课题研究报告和科研论文。